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Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒

Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過免疫沉淀（染色質(zhì) IP）高效分離染色質(zhì)結(jié)合 DNA 的便利方法，用于隨后通過 PCR 進(jìn)行定量分析。

磁性 ChIP 試劑盒的特點(diǎn)：

•快速— 可在約 8 小時(shí)內(nèi)獲得適于進(jìn)行定量 PCR 的純化 DNA
•高效且可重現(xiàn)—微球菌核酸酶酶切過程和細(xì)胞核裂解過程均經(jīng)高度優(yōu)化
•靈敏—只需 10,000 個(gè)細(xì)胞 (1 x 10^4) 即可獲得結(jié)果
•低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的試劑中進(jìn)行封閉，可極大限度地降低背景
•全面—包括優(yōu)化的陽(yáng)性對(duì)照試劑：RNA 聚合酶 II 抗體和 GAPDH 啟動(dòng)子 PCR 引物

Pierce 磁性染色質(zhì)免疫沉淀分析 (ChIP) 試劑盒含有足夠的試劑，可使用優(yōu)化的方案采用適當(dāng)對(duì)照品進(jìn)行 30 次 ChIP 檢測(cè)。試劑盒中包含的試劑可用于裂解細(xì)胞、捕獲蛋白-DNA 復(fù)合物，逆轉(zhuǎn)交聯(lián)以及分離 DNA。封閉 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的結(jié)合容量和較低的非特異性背景，可與很多種抗體一起使用。這些微珠可與磁力架或自動(dòng)化平臺(tái)（例如，Thermo Scientific KingFisher 儀器）一起用于手動(dòng)工作流程。還提供經(jīng)驗(yàn)證適用于 ChIP 且具備質(zhì)量保證的抗體，與 Pierce 磁性 ChIP 試劑盒配合使用。

包括：
試劑盒含有用于染色質(zhì)制備、IP 以及 DNA 純化的試劑，同時(shí)也包含陽(yáng)性對(duì)照品（抗體和引物）

需要：
體內(nèi)交聯(lián)劑（如甲醛）、微量吸頭超聲波儀（如 Misonix™ 超聲波儀 3000）、符合 ChIP 要求的首xuan抗體、目標(biāo) DNA 序列的 PCR 引物、PCR 預(yù)混液（如果需要 qPCR，則含有一種染料，如 SYBR™ Green）和 qPCR 儀器

應(yīng)用：
• 通過 PCR 或 ChIP-Seq 確定基因組 DNA 上特異性蛋白-DNA 相互作用的位點(diǎn)
• 監(jiān)測(cè)組蛋白修飾或化學(xué)制劑對(duì) DNA 結(jié)合的影響

要想成功進(jìn)行 ChIP 檢測(cè)，需要在檢測(cè)靶標(biāo)基因組 DNA 之前執(zhí)行多個(gè)關(guān)鍵步驟（交聯(lián)、染色質(zhì)制備、免疫沉淀）。單獨(dú)來講，ChIP 實(shí)驗(yàn)方案中的每一步在優(yōu)化時(shí)都很費(fèi)時(shí)間。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒簡(jiǎn)化了 ChIP 流程，可獲得準(zhǔn)確且可重現(xiàn)的結(jié)果。

蛋白-DNA 復(fù)合物首先在體內(nèi)與甲醛交聯(lián)。試劑盒含有的試劑可以裂解細(xì)胞，并可提取和溶解交聯(lián)復(fù)合物。然后，將復(fù)合物和特異性抗體放在一起進(jìn)行孵育，最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠進(jìn)行分離。在逆轉(zhuǎn)交聯(lián)和酶切蛋白后，純化所得 DNA 片段，然后準(zhǔn)備進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)或定量 PCR。

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒