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qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

  • 更新時(shí)間:  2023-07-26
  • 產(chǎn)品型號(hào):  204145
  • 簡(jiǎn)單描述
  • qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)
    QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通過(guò)兩步法real-time RT-PCR對(duì)cDNA目標(biāo)序列進(jìn)行高特異性的定量檢測(cè)。熱啟動(dòng)和*的實(shí)時(shí)定量PCR緩沖液確保了對(duì)cDNA目標(biāo)序列高特異性和靈敏度的real-time定量檢測(cè)。dNTP混合液含有dUTP,
詳細(xì)介紹

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

使用SYBR Green I進(jìn)行兩步法RT-PCR,用于基因表達(dá)分析

  • 整合熱啟動(dòng),PCR特異性高
  • 可靠定量檢測(cè)低豐度轉(zhuǎn)錄本
  • 準(zhǔn)確定量檢測(cè)各種起始量樣本
  • 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)兩種包裝
  • 無(wú)需優(yōu)化反應(yīng)和循環(huán)條件

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

  • Real-Time PCR酶與試劑盒
  • qPCR16
  • 一步法RT-PCR20
  • 兩步法RT-PCR29

QuantiTect SYBR® Green PCR Kits

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 Product picture

使用SYBR Green I進(jìn)行兩步法RT-PCR,用于基因表達(dá)分析

  • 整合熱啟動(dòng),PCR特異性高
  • 可靠定量檢測(cè)低豐度轉(zhuǎn)錄本
  • 準(zhǔn)確定量檢測(cè)各種起始量樣本
  • 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)兩種包裝
  • 無(wú)需優(yōu)化反應(yīng)和循環(huán)條件

QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通過(guò)兩步法real-time RT-PCR對(duì)cDNA目標(biāo)序列進(jìn)行高特異性的定量檢測(cè)。熱啟動(dòng)和*的實(shí)時(shí)定量PCR緩沖液確保了對(duì)cDNA目標(biāo)序列高特異性和靈敏度的real-time定量檢測(cè)。dNTP混合液含有dUTP,可選擇性進(jìn)行UNG處理。為便于使用,預(yù)混液可儲(chǔ)存在2–8°C。

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  • 在ABI PRISM 7700上實(shí)現(xiàn)高度靈敏的定量檢測(cè)。

  • 特異性定量檢測(cè)。

  • 特異性的靈敏檢測(cè)。

  • 高度特異性的real-time PCR。

  • 特異性定量檢測(cè)。

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特異性定量檢測(cè)。

在Rotor-Gene 3000上使用針對(duì)人BAX的QuantiTect Primer Assay和的試劑盒分析稀釋的人白細(xì)胞cDNA。熔解曲線分析中出現(xiàn)單峰,NTC反應(yīng)呈平直曲線,說(shuō)明使用QuantiTect Kit和Assay可實(shí)現(xiàn)高特異性定量。NTC:無(wú)模板對(duì)照。Norm. Fluoro.:標(biāo)準(zhǔn)化的熒光。

Performance

QuantiTect SYBR Green PCR Kit在寬泛的范圍內(nèi)符合線性規(guī)律,可實(shí)現(xiàn)特異性定量檢測(cè)(參見(jiàn)"Specific quantification over a wide linear range")。與其他聚合酶相比,HotStarTaq DNA Polymerase具有嚴(yán)格的熱啟動(dòng),進(jìn)一步提高了PCR反應(yīng)的特異性。*的PCR緩沖液和HotStarTaq DNA Polymerase,確保低豐度轉(zhuǎn)錄本的定量檢測(cè),低至5個(gè)拷貝的目標(biāo)序列也可被準(zhǔn)確檢測(cè)(參見(jiàn)"Highly specific amplification")。QuantiTect SYBR Green PCR Kit與QuantiTect Reverse Transcription Kit和QuantiTect Primer Assays配合使用,可獲得靈敏、可靠的結(jié)果(參見(jiàn)"Specific and sensitive quantification")。

QuantiTect SYBR Green PCR +UNG Kit中經(jīng)特別優(yōu)化的UNG溶液配合經(jīng)驗(yàn)證的PCR預(yù)混液可有效避免PCR產(chǎn)物中的殘留污染,并對(duì)靶序列進(jìn)行可靠的定量檢測(cè)(參見(jiàn)"High specificity in real-time PCR")。

Principle

QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有優(yōu)化的即用型預(yù)混液,可使用SYBR Green I對(duì)cDNA靶序列進(jìn)行高特異性和靈敏度的real-time定量分析。預(yù)混液中的熒光染料SYBR Green I可對(duì)很多不同的靶序列進(jìn)行分析,無(wú)需合成靶標(biāo)特異性標(biāo)記引物。*的PCR緩沖液含有K+和NH4+,能促使特異性引物退火,獲得高PCR特異性和靈敏度(參見(jiàn)"Specific primer annealing")。此外,HotStarTaq DNA Polymerase具有嚴(yán)格的熱啟動(dòng),可防止非特異性產(chǎn)物的形成。

QuantiTect SYBR Green PCR預(yù)混液含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 (UNG)預(yù)處理,保證之前反應(yīng)殘留的PCR產(chǎn)物會(huì)影響后續(xù)的PCR反應(yīng)。

2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的組份
組份特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)
HotStarTaq DNA Polymerase95ºC孵育15分鐘即可活化室溫下即可構(gòu)建qPCR反應(yīng)體系
QuantiTect SYBR Green PCR BufferNH4+和K+的平衡組合特異性引物退火確保PCR結(jié)果可靠
dNTP mix含有dUTP,會(huì)部分替代dTTP,可進(jìn)行UNG處理可選擇進(jìn)行UNG處理,以消除之前反應(yīng)殘留的PCR產(chǎn)物
SYBR Green I dyeDNA雙鏈結(jié)合時(shí),生成強(qiáng)烈的熒光信號(hào)高度靈敏的定量檢測(cè)
ROX dye在Applied Biosystems或Agilent的PCR儀上進(jìn)行熒光信號(hào)校準(zhǔn)可在需要ROX染料的PCR儀上進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測(cè)。不會(huì)干擾其他real-time PCR儀
 

Procedure

QuantiTect SYBR Green PCR Kit無(wú)需進(jìn)行繁瑣耗時(shí)的反應(yīng)條件優(yōu)化。只需簡(jiǎn)單地將引物、探針和cDNA模板加入到即用型PCR預(yù)混液中,即可開(kāi)始反應(yīng)(參見(jiàn)"Two-step RT-PCR")。使用操作手冊(cè)中的實(shí)驗(yàn)方案可在任何real-time PCR儀上得到快速、可靠的結(jié)果。如果需要,反應(yīng)液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)預(yù)處理,以去除之前反應(yīng)殘留的PCR產(chǎn)物。

為在兩步法real-time RT-PCR中獲得理想結(jié)果,我們推薦使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此試劑盒可在20分鐘內(nèi)快速合成cDNA,并可去除基因組DNA污染。

QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表達(dá)分析中獲得高度特異性的結(jié)果?;蚪M范圍、生物信息學(xué)驗(yàn)證的引物對(duì)覆蓋所有人類(lèi)、小鼠、大鼠和其他各類(lèi)生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe上方便地訂購(gòu)。


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